农杆菌介导的枳壳转化系统建立研究初报

以枳壳为对象 ，进行了农杆菌介导的上胚轴转化系统建立研究 ，得到了携带柑桔衰退病病毒外壳蛋白基因的枳壳转化植株。研究表明：枳壳各类外植体中 ，上胚轴是较好的转化材料 ;上胚轴出芽部位主要在形态学上端。以卡那霉素为选择剂 ，外植体水平面放置时 ，选择剂的剂量是 50～ 70mg/ L。转化研究中发现感染液中乙酰丁香酮 10 0μmol/ L的加入促进转化外植体 Gus表达阳性率的提高。延迟 1a的选择培养 ，有助于 Gus阳性芽的增多。所得 Gus阳性无性系经 Southern blot杂交检测 ，证明外源基因已稳定整合到了植物基因组中 ，所得 Gus阳性植株确为携带柑桔衰退病病毒外壳蛋白基因的转化植株。