利用cDNA-AFLP技术获得小麦耐盐性相关基因TaVHA-C

【目的】利用cDNA-AFLP技术对耐盐性受主效基因控制的小麦品系98-160盐胁迫前后基因表达的变化进行分析。 【方法】对112个克隆的cDNA差异表达片段进行了Blast-x分析。 【结果】约有65.2%的片段与已知基因有较高的同源性,从中筛选出18个与小麦耐盐性密切相关的片段,主要包括转录因子、与离子转运有关的蛋白、信号传导相关蛋白、胁迫相关蛋白以及与蛋白-蛋白相互作用有关的蛋白。以94号片段为基础,通过电子延伸和RT-PCR,克隆了小麦液泡膜ATPaseC亚基(TaVHA-C)的全长cDNA,Northern结果表明,在胁迫的早期(0～2h)TaVHA-C基因的表达基本不变,随着胁迫时间的延长(6～12h),TaVHA-C基因的表达逐渐减弱,以后(24～72h)又逐渐增强。低温对TaVHA-C基因的表达有明显的抑制作用。 【结论】利用cDNA-AFLP技术分离差异表达片段进行相关基因的研究是可行的。