芜菁花叶病毒山东分离物外壳蛋白基因的克隆及序列分析

从山东省 3 地市感病的白菜和萝卜上分离到芜菁花叶病毒 6 个分离物,将其分别命名为 TuMV-SD1、TuMV-SD2、TuMV-SD3　、TuMV-SD4、　TuMV-SD5 和 TuMV-SD6。利用 RT-PCR 克隆了这 6 个分离物的外壳蛋白基因,测定了它们的核苷酸序列,并进行了序列分析。结果表明,6 个分离物的 CP 基因均为 867 个碱基,核苷酸序列同源性较高,　达 97.0%～99.4%;它们与 World-B 组分离物的同源性最高,达 91.8%～100%;与 Brassica-　Raphanus　(BR)　致病型分离物的同源性次之,在 89.1%～91.0%之间;与 basal-B 组分离物的同源性最低,仅 86.0%～90.3%。基于 TuMV 的 CP 基因核苷酸序列的分子进化树显示,TuMV 分离物可分为 4 组,本研究所分离到的 6 个 TuMV 山东分离物属于第四组,即 world-B 组。用分离到的 6 个 TuMV 分离物对已获得的转 TuMV　CP 基因的抗病毒大白菜进行攻毒试验。结果表明,尽管作为转基因的 CP 基因与这 6 个分离物的 CP 基因只有 88.2%～88.9%的同源性,但转基因大白菜对这 6 个分离物均具有明显抗性。