猪IL-2与IL-6的原核表达及其对伪狂犬病基因缺失疫苗的佐剂效应研究

将猪白细胞介素2（pIL-2）与猪白细胞介素6（pIL-6）的cDNA序列克隆到大肠杆菌表达载体pET-28a及pGEX-KG上,转化BL21（DE3）表达菌,经IPTG诱导产生重组蛋白pIL-2与pIL-6,表达量分别占菌株总蛋白的43.45％和28.37％,经提纯后含量可分别达到97.06％和86.37％。将提纯后不同剂量的两种重组蛋白以单独或组合的方式,加入伪狂犬病（Ea株）TK^-/gG^-双基因缺失疫苗中,使每头份疫苗分别含2、5和10μg·ml^-1的pIL-2或（和）pIL-6,用此疫苗免疫伪狂犬病抗体阴性猪。同时设试验对照组。初次免疫30d后加强免疫,测定中和抗体,观察试验猪的日增重情况,进行统计分析。发现各试验组的抗体水平均高于不含重组蛋白的基因缺失疫苗组;其中,含2μg·ml^-1pIL-2试验组与含10μg·ml^-1pIL-2/pIL-6试验组抗体水平和基因缺失疫苗对照组之间呈显著差异（P=0.019）与极显著差异（P=0.009）。结果表明,大肠杆菌表达的pIL-2、pIL-6对伪狂犬病鄂A株基因缺失疫苗（TK^-/gG^-/LacZ⁺）有较强的佐剂效应,且呈剂量相关性。不同试验组日增重比较结果表明,免疫效果高低与猪的生长速度呈正相关。本试验为重组pIL-2与pIL-6作为新型疫苗佐剂应用提供了重要的试验依据。