从水稻叶绿体基因文库中快速克隆叶绿体基因

利用多聚酶链式反应（ＰＣＲ）法，从水稻的叶绿体基因文库中克隆并鉴定了两个含强启动子的叶绿体光调控基因ｐｓｂＡ和ｒｂｃＬ。根据已发表的水稻叶绿体基因组的序列，分别设计合成了ｐｓｂＡ基因两端的引物５＇ｔｔｃｃｇｇｇｇｔｃｇａｃｔｃｃｃｇｇｇｃａａｃｃ３＇和引物５＇ｔａａｃｔｇａａｔｔｃａｇａａｔａｇ３＇以及ｒｂｃＬ基因两端的引物５＇ｔｃａａｇｃｔｔｔａｇｇｔａｔｔｔｃｃａｃｔｃ３＇和引物５＇ａｃｇｔｃｇａｃａａｇｔｃｔｃａｔｇａｔｃｇｔａｔｃ３＇，以水稻叶绿体基因文库的ｃｐＤＮＡ为模板，进行ＰＣＲ反应。电泳回收所需片断，酶切后再将它们克隆到ｐＵＣＩ９载体上，并对它们进行了ＤＮＡ序列和限制性酶切位点的分析。