应用PCR技术快速检测柑桔溃疡病的研究

应用PCR检测柑桔溃疡病,所用引物为5 ’ TTGGTG TCGTCGCTTGTAT 3 ’和5’CACGGGTGCAAAAAATCT 3’。从病样的叶片、果皮和枝皮抽提溃疡病菌核酸进行PCR扩增,其产物经琼脂糖凝胶电泳,产生大约220 bp的特征条带, 与纯培养溃疡病菌的PCR产物一致。试验比较两种核酸抽提方法,微量快速抽提法的灵敏度明显高于高盐抽提法。有症状病样品的不同部位均能检测到溃疡病;病株的无症状叶片、果皮、枝皮有部分检测到病菌。病果园健康植株大多数检测不到病菌,少数植株PCR产物电泳条带较弱。取样量以10~20 mg为宜。该PCR技术可用于快速检测柑桔溃疡病。