分泌型Cecropin B抗菌肽基因转化血橙提高其抗溃疡病水平

为了利用Cecropin B(CB)抗菌肽基因提高柑橘对溃疡病的抗性,人工合成了两个含有信号肽的Cecropin B抗菌肽基因PR1aCB和AATCB。洋葱表皮瞬时表达分析表明,与非分泌型CB抗菌肽相比,PR1aCB和AATCB抗菌肽在细胞间隙中优势积累。进一步构建了CaMV 35S调控PR1aCB和AATCB基因的植物表达载体,转化塔罗科血橙(Citrus sinensis Osbeck)上胚轴,获得转基因植株。GUS组织化学染色、PCR和Southern blot分析表明外源基因已成功整合入柑橘基因组。Real-time PCR定量分析表明,抗菌肽基因在转基因植株中成功表达。柑橘叶片离体抗性分析表明,转PR1aCB和AATCB基因植株的抗性显著强于非转基因植株,其抗性水平与高抗品种‘南丰蜜橘’(C.succosa Hort.Ex Tan)和‘四季橘’(C.madurensis)相当。