猪精液0.5ml细管快速冷冻和解冻方法的优化

【目的】优化冷冻-解冻方法,提高0.5ml细管快速冷冻保存猪精液的质量。 【方法】冷冻方法:分别将细管水平置于液氮面上方3、5、7、9和11cm处,每一水平位置细管分别熏蒸3、5、10、15和20min后投入液氮保存,37℃×30s水浴解冻,确定最优冷冻方法;在选择最优冷冻方法的基础上,分别采用37℃×30s(对照组)、42℃×25s、47℃×20s、52℃×15s、57℃×10s和62℃×5s共6种方法水浴解冻,确定最佳解冻方法。 【结果】采用3cm×10min冷冻方法,解冻0、8h精液中精子活率、质膜完整率和顶体完整率均最高。采用相对&quot;高温短时"解冻,精子活率、质膜完整率、顶体完整率和线粒体膜电位均较高,同时丙二醛浓度降低;57℃×10s和62℃×5s解冻的精子各项指标无显著差异(P>0.05),但前4项指标显著高于对照组(P<0.05),丙二醛浓度显著降低(P<0.05)。 【结论】优化猪精液0.5ml细管快速冷冻的冷冻和解冻方法可以显著提高解冻质量,采用3cm×10min冷冻、57℃×10s或62℃×5s解冻方法效果最佳。