番茄基因转化中抗生素筛选压力的确定方法

在以抗生素为筛选标记的基因转化中,确定适宜的筛选压力是提高基因转化率的前提。本研究以卡那霉素为例,通过在10mg/L,20mg/L,30mg/L,50mg/L,100mg/L的筛选压力下,转化和非转化番茄子叶外植体的生长表现、愈伤组织和芽的分化率,来确定适宜的筛选浓度。本实验以该方法找到的适宜的卡那霉素筛选浓度为50mg/L。以此浓度为筛选压力进行遗传转化所获得的部分再生苗经southernblot鉴定,均为转化株。