田菁(Sesbania rostrata)cosmid基因组文库的建立和豆血红蛋白基因序列的克隆

本文利用mini-Ti质粒和λ噬菌体cos位点构建的植物cosmid载体,建立了茎瘤田菁cosmid基因组文库,并分子克隆了茎瘤田菁豆血红蛋白基因片段。改进了原有的万法.得到b 植物大分子DNA片段和高效价的λ噬菌体体外包装物,为植物cosmid基因组文库的建立提供了关键的条件。菌落原位杂交筛选1.0×10~5菌落,获得4个含有茎瘤田菁豆血红蛋白基因序列的阳性克隆。质粒DNA点杂交和Southern blot杂交进一步证明了田菁豆血红蛋白基因序列的克隆。